島津高效液相色譜儀是一種用于分離、識別和定量分析化合物的實(shí)驗(yàn)儀器,廣泛應(yīng)用于化學(xué)、制藥、食品、環(huán)境等多個領(lǐng)域。利用液體流動相通過裝填有固定相的色譜柱,基于不同物質(zhì)在固定相和流動相中的分配差異,來實(shí)現(xiàn)分離。下面詳細(xì)介紹島津高效液相色譜儀的工作原理。
1、樣品注入
分析過程始于樣品的注入。樣品通過自動進(jìn)樣器或手動注射器進(jìn)入色譜系統(tǒng)。注射器的作用是將樣品精確地引入流動相中,確保每次注入的樣品量一致。常見的進(jìn)樣方式是液體進(jìn)樣,部分系統(tǒng)還支持固體樣品的溶解后進(jìn)樣。
2、流動相(溶劑)泵送
使用泵系統(tǒng)將液體流動相按設(shè)定流速注入色譜柱中。流動相的選擇非常重要,因?yàn)樗绊懛蛛x效率和分離時間。流動相可以是單一溶劑,也可以是溶劑的梯度混合。島津HPLC系統(tǒng)的泵具有高壓力,確保流動相能夠以非常高的壓力通過色譜柱,克服色譜柱內(nèi)部的阻力,從而實(shí)現(xiàn)高效分離。
3、色譜柱與固定相
色譜柱是島津高效液相色譜儀的核心部分,內(nèi)部填充有細(xì)小的顆粒,這些顆粒即為固定相。固定相的類型取決于待分析物質(zhì)的性質(zhì)。樣品與流動相一同進(jìn)入色譜柱,在固定相內(nèi)發(fā)生不同的分配作用,不同的組分在色譜柱中滯留的時間不同,導(dǎo)致它們被分離開來。

4、分離過程
在色譜柱內(nèi),樣品的各組分由于與固定相的親和力不同,分別以不同的速度通過色譜柱。滯留時間較長的組分通常在固定相上有較強(qiáng)的相互作用,因此它們會被延遲,滯留時間短的組分則較早流出。這個分配過程是HPLC的核心原理,依賴于樣品與固定相之間的物理和化學(xué)相互作用,如極性、分子量等。
5、檢測
當(dāng)分離后的組分通過色譜柱流出時,它們會進(jìn)入檢測器。常配備UV-Vis檢測器,該檢測器通過檢測流出液中各組分對紫外光或可見光的吸收來識別各個組分。根據(jù)分子對特定波長的吸收程度,檢測器輸出信號并生成色譜圖。
島津高效液相色譜儀通過精密的泵系統(tǒng)、優(yōu)化的色譜柱和高效的檢測系統(tǒng),能夠?qū)?fù)雜樣品中的各組分分離開來并進(jìn)行定量分析。其工作原理基于樣品在流動相和固定相中的分配差異,通過控制流動相的流速、溶劑的選擇和色譜柱的性質(zhì),達(dá)到高效分離的目的。